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奧林巴斯顯微鏡光路照明系統的調整有4項內容

更新時間:2019-11-18      瀏覽次數:2464

(1) 照(zhao)明光源燈室在顯微外的(de)初步(bu)調(diao)整
① 首先將燈室的外殼打開,壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中,安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔住),以免燈泡上留有指紋等臟物,影響燈泡的使用壽命。
② 把燈室擺在桌面上,接通電源后,用的螺絲刀調節燈的調焦旋鈕孔(標有"←→"),使燈絲投影在1-2m外的墻上,將燈絲成像調至清晰;然后調節燈的高低位置調節絲孔(標有"──"),使燈絲位置高低適當;再調節燈的左右位置調節螺絲孔(標有"──"),使燈絲左右位置合適。 

2) 光源(yuan)發(fa)光體(燈絲)在奧林巴斯(si)顯微(wei)鏡內位置的檢驗和(he)校正:
目的是為了把發光體的像端端正正地調入物鏡的視域范圍內,從光源的角度去確保奧林巴斯顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明,這是調整庫勒照明系統的前提條件。需要的基本工具:對中望遠鏡購置奧林巴斯顯微鏡時已配備。
① 拔掉燈庫內的毛玻璃套筒,把燈室裝回奧林巴斯顯微鏡上;

② 選用(yong)10×物鏡,開亮光源程序找(zhao)樣品并調焦(jiao)清晰,再換(huan)用(yong)40×物鏡把樣品調焦(jiao)清 晰(40×物鏡可以(yi)看清燈絲的全貌);

③ 把聚光鏡的孔徑光闌和視場光闌均開到大;
④ 拔掉其中一個目鏡,換上對中望遠鏡,抓住白色部分,另一手伸縮黑色接目鏡,就可在視野中看到燈絲像;
⑤ 如燈絲位置不合適,調"──"孔,把燈絲像沿水平方向調好,調"──"孔,把絲像沿垂直方向調好,直至將燈絲像調至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像;
⑥ 調整完畢后,將毛玻璃套筒插回原位,拔掉對中望遠鏡,換回目鏡作下一步調整。以上所述照明光源燈室在奧林巴斯顯微鏡外的調整和光源發光體在奧林巴斯顯微鏡內位置的校驗,只需在奧林巴斯顯微鏡初次安裝調試及更換燈泡時進行,平時使用奧林巴斯顯微鏡時不能隨意亂調亂動。萬一調亂時,可按上述步驟調回原狀。

(3) 庫勒照(zhao)明(Kohler)系(xi)統的(de)正(zheng)確調整(zheng):

 奧(ao)林(lin)巴(ba)斯(si)顯(xian)微鏡的(de)正確(que)調(diao)(diao)試,主要工作(zuo)之一是照(zhao)(zhao)明光路(lu)系統的(de)調(diao)(diao)整(zheng),而(er)其(qi)中的(de)關鍵是庫(ku)勒照(zhao)(zhao)明系統的(de)調(diao)(diao)整(zheng)。對(dui)于每一位使用奧(ao)林(lin)巴(ba)斯(si)顯(xian)微鏡的(de)人(ren)員,特(te)別是作(zuo)顯(xian)微照(zhao)(zhao)像(xiang)的(de)人(ren)員來(lai)說,應該對(dui)庫(ku)勒照(zhao)(zhao)明系統的(de)原理及其(qi)調(diao)(diao)整(zheng)步(bu)驟有一定的(de)了(le)解和(he)掌握,才能(neng)充分發(fa)揮奧(ao)林(lin)巴(ba)斯(si)顯(xian)微鏡應有的(de)功(gong)能(neng),拍出來(lai)的(de)照(zhao)(zhao)片才能(neng)在效果上(shang)比較(jiao)一致而(er)又(you)完善。

庫(ku)勒照明(ming)系統的原理(li)簡單來說就(jiu)是:光(guang)(guang)源(yuan)(yuan)發光(guang)(guang)體上任意一點發出的光(guang)(guang),可以照明(ming)奧(ao)林巴(ba)(ba)斯顯(xian)微(wei)鏡的視域范圍,而光(guang)(guang)源(yuan)(yuan)發光(guang)(guang)體上每一點所(suo)發出的光(guang)(guang)匯集起來,在奧(ao)林巴(ba)(ba)斯顯(xian)微(wei)鏡的視域中就(jiu)實現了非常充分(fen)而又均勻的照明(ming)。

調整庫勒照明系(xi)統的(de)目的(de),是為了使所觀(guan)察的(de)視域能獲得均勻而又充分的(de)照明,防止雜(za)散光對照像系(xi)統造成影響或干擾(rao),以(yi)免(mian)照像時在底(di)片形成灰霧。

高調整庫勒照明系統的必要部件:視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡系統。
① 選用10×物鏡和10×目鏡;
② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中,孔徑光闌調至適中的位置上(不大不小),再把聚光鏡升到頂的位置上,聚光鏡轉盤調至明視野"J"位置;
③ 把視場光闌調至小(0。1);
④ 載物臺上放上已封片的生物樣品,開亮光源,調焦清晰;
⑤ 視域中會出現一個局部照明的區域或亮斑,這是視場光闌的模糊像,在其中可以清晰地看到樣品的細節;在它之外是較暗的視域,不一定能把樣品的細節看得清楚;
⑥ 把聚光鏡微微地向下調,使視野中的亮斑逐漸收小,慢慢變成一個清晰的多邊形象,這便是視場光闌的清晰像;
⑦ 一般情況下,多邊形象并不在視域中央,需要調整聚光鏡的一對調中螺絲,把視場光闌多邊形的像調至中央位置;
⑧ 逐漸開大視場光闌,使多邊形象成為視域的內接多邊形,進一步核對調中的狀況,如對中不夠理想,繼續微微調對中螺絲;
⑨ 將視場光闌稍為再微微開大一些,使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上,至此,庫勒照明系統調整完畢。庫勒照明系統調整好以后,整個視域照明均勻,拍攝的顯微照片明亮清晰,反差正常。

在日后使(shi)用過(guo)程中應特別注意:

 a。 視場光(guang)闌(lan)不可任意開(kai)(kai)大(da),但(dan)可隨物鏡倍數的增大(da)而將視場光(guang)闌(lan)收小(xiao),隨物鏡倍數的減(jian)小(xiao)而開(kai)(kai)大(da);

 b。 聚光鏡的(de)(de)高低位(wei)置不準亂調,否則會破壞(huai)已調整好的(de)(de)庫勒照明系(xi)統;

 c。 使用10×以下物鏡時要將(jiang)聚光鏡前(qian)端透鏡擺(bai)出光路(lu)外,使用10×或(huo)10×以上物鏡時要將(jiang)前(qian)端透鏡擺(bai)入光路(lu)中(zhong);

 d。 關(guan)于物鏡倍數與視(shi)場光闌大(da)小配合問題,在實際使用過(guo)程中,作為(wei)一(yi)(yi)般(ban)觀察不一(yi)(yi)定(ding)要(yao)收小或開大(da)視(shi)場光闌,但(dan)作顯(xian)微照(zhao)(zhao)相時,為(wei)了避(bi)免(mian)雜散光線對照(zhao)(zhao)相系統的(de)干擾(rao),以便能(neng)拍攝到較(jiao)完(wan)善的(de)照(zhao)(zhao)片,則應(ying)在使用每一(yi)(yi)個(ge)倍數的(de)物鏡時,把視(shi)場光闌調節到正(zheng)好消失(shi)于所觀察的(de)視(shi)域(yu)邊上,這是比較(jiao)繁復的(de)工作,但(dan)又(you)非做不可。

較(jiao)為簡便(bian)的(de)方法是把(ba)與各(ge)個(ge)倍數物鏡相對應的(de)視場(chang)光闌事先(xian)調整好,并作好記號,以后使用時根據記號直接調至(zhi)相應的(de)位(wei)置。

(4) 孔徑光闌的正確使用: 
由于聚光鏡的(de)(de)孔徑光闌可以影響奧林(lin)巴斯顯(xian)微鏡的(de)(de)分(fen)辨率,使(shi)用時應掌握正確的(de)(de)使(shi)用方法。

過去(qu)由于對孔徑(jing)(jing)(jing)光(guang)闌的認識不(bu)足(zu),往往把它(ta)(ta)當(dang)作(zuo)是調(diao)節視野亮度(du)的工具。雖(sui)然調(diao)節孔徑(jing)(jing)(jing)光(guang)闌在(zai)(zai)一(yi)定程度(du)上可以改變視野的亮度(du),但(dan)會直(zhi)接(jie)影響成像的反差(cha)、對比度(du)及分辨率(lv),在(zai)(zai)使用(yong)(yong)過程中應盡可能避免。為了發揮聚光(guang)鏡孔徑(jing)(jing)(jing)光(guang)闌的作(zuo)用(yong)(yong),以便在(zai)(zai)觀察時,尤(you)其在(zai)(zai)作(zuo)顯微照相時獲(huo)得(de)分辨率(lv),在(zai)(zai)每換(huan)用(yong)(yong)一(yi)個倍數(shu)的物(wu)鏡時,在(zai)(zai)樣品調(diao)焦清晰后,需要調(diao)節孔徑(jing)(jing)(jing)光(guang)闌,使它(ta)(ta)的大小正好(hao)等(deng)于所用(yong)(yong)物(wu)鏡數(shu)值(zhi)孔徑(jing)(jing)(jing)(物(wu)鏡孔徑(jing)(jing)(jing)像)的2/3。

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