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熒光顯微鏡及熒光數碼成像拍照的選擇及注意事項

更新時間:2021-08-10      瀏覽次數:2679

熒光顯微(wei)鏡以及熒光拍照(zhao)相機(顯微鏡相機)

熒光顯(xian)微鏡是用(yong)短波(bo)長的光線照射用(yong)熒光素(su)染(ran)色過的被檢物體,使(shi)之受激發后(hou)而產生長波(bo)長的熒光,然后(hou)觀察。熒光顯(xian)微鏡廣(guang)泛應用(yong)于物,醫學(xue)等領(ling)域(yu)等

熒光顯(xian)微鏡般分為(wei)透射和落射式(shi)兩(liang)種(zhong)類型。

a.透(tou)射式激發(fa)光來自被檢物體的(de)下方,聚光鏡為暗(an)(an)視野(ye)聚光鏡,使發(fa)光不進(jin)入物鏡,而(er)(er)使熒光進(jin)入物鏡。它在低(di)倍情況下明(ming)(ming)亮(liang),而(er)(er)高怕僅暗(an)(an),在注漫和淘中時,較誰操作,尤以(yi)低(di)倍的(de)照明(ming)(ming)被圍準于(yu)確定,但能得到很暗(an)(an)的(de)視野(ye)背景。透(tou)射式不使用于(yu)非透(tou)明(ming)(ming)的(de)被檢物體。

b.落射式目前幾(ji)乎(hu)被(bei)淘汰(tai),新(xin)型的(de)熒光顯微統多(duo)為落射式,光源來(lai)自被(bei)檢(jian)動依的(de)上方,在光路中具有分光鏡,所以(yi)對透(tou)明(ming)和不適明(ming)的(de)被(bei)檢(jian)物休體都適用(yong)。由于物確(que)起了聚光接的(de)作用(yong),不僅(jin)便于操作,而且從低倍到高(gao)倍,可(ke)以(yi)實現整個視場(chang)的(de)均勻照明(ming)。

(2)熒光鏡檢術的注(zhu)意事項

a.激發(fa)光長時(shi)(shi)間(jian)的照(zhao)射,會(hui)發(fa)生(sheng)光的衰減(jian)和淬滅現象,因此盡可能(neng)縮短觀察時(shi)(shi)間(jian),暫時(shi)(shi)不(bu)觀察時(shi)(shi),應用擋板(ban)遮蓋(gai)發(fa)光。

b.作(zuo)油鏡觀察時(shi),應用無熒光鏡油"

c.做熒(ying)光(guang)(guang)實驗,普(pu)遍熒(ying)光(guang)(guang)比(bi)較弱,應在較暗(an)的室內進行。電源(yuan)可裝穩壓(ya)器,否(fou)則電壓(ya)不(bu)穩不(bu)僅會降低汞燈(deng)的壽命,也會影響效果(guo),目前新(xin)研究領域(yu)都(dou)會用(yong)到熒光顯微鏡,如基因原位雜交FISH)等。

熒光拍攝通常需要(yao)使用制冷型CCD(成像系統相機(ji)),因為制(zhi)冷CCD可(ke)以(yi)減(jian)少背(bei)景噪聲,對(dui)弱熒光(guang)信號采集很有好處,特別(bie)是像(xiang)單分子成(cheng)像(xiang)。采集強光(guang)信號不一定(ding)要(yao)用制(zhi)冷(leng)CCD,可使用黑白(bai)相機(ji),彩色相機(ji)不適合(he)熒光(guang)(guang)采集,因為其感光(guang)(guang)度(du)低(di)、分辨率也低(di),除非熒光(guang)(guang)信號很高(gao),對分辯率要求不高(gao)或者使用雙通道濾色片(pian)時(shi)才適合(he)用彩色相機(ji)。

熒(ying)光顯微鏡可(ke)以用啟步BM1000Z 2000Z ; BM4000D BM3000D,進口可(ke)使用奧(ao)林巴斯BX53BX43、CKX53。尼康NI、CI系列等都可以,相機也可以用我公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等(deng)都是不(bu)錯的選擇。


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