PCR：即合(he)酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)，利用(yong)DNA在體(ti)外95℃時(shi)解旋（變性），55℃時引物與單(dan)鏈按堿(jian)基互補(bu)配(pei)對的原則結(jie)合（退火(huo)），再調(diao)溫度至72℃左(zuo)右，DNA聚合酶沿著磷酸(suan)到五碳糖(5'-3')的方(fang)向合成互補鏈（延伸）。

PCR儀(yi)實際(ji)就是(shi)一個溫控設備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進行溫度(du)控制。

根據(ju)DNA擴(kuo)增(zeng)的(de)目(mu)的(de)和(he)檢測的(de)標準可以將PCR儀分(fen)為：普通PCR儀，梯(ti)度(du)PCR儀(yi)，原位PCR，實(shi)時熒光定(ding)量PCR儀等幾類

普(pu)通(tong)PCR儀(yi)：

一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀，稱之為(wei)普通PCR儀，也就是傳統的PCR儀。如果要(yao)(yao)用它做不同的退火溫度則需(xu)要(yao)(yao)多次(ci)運行。

   普通PCR儀主(zhu)要應用于科研、教學、臨床醫學、檢驗、檢疫等。

如:啟步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型

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梯度(du)PCR儀：

一次性PCR擴(kuo)增可以(yi)設(she)置一系(xi)列不同的(de)退(tui)火溫度條件（通常12種溫度(du)梯(ti)度(du)）的稱之為(wei)梯(ti)度(du)PCR儀。不(bu)同的DNA片段(duan)其(qi)的退火溫度(du)不(bu)同(tong)，通過設置一(yi)系(xi)列(lie)的梯(ti)度(du)退火溫度(du)進行(xing)擴增(zeng)，從而一(yi)次性PCR擴(kuo)增就可以篩選出表達量高的(de)退火溫度進(jin)行有效(xiao)的(de)擴(kuo)增。

    梯度PCR儀主要用于研究未(wei)知DNA退火溫度的擴增，這(zhe)樣既(ji)節(jie)約(yue)時間，也節(jie)約(yue)成本。在不(bu)設(she)置(zhi)梯度的情況下亦可(ke)當做(zuo)普通的PCR用。梯度PCR儀(yi)多應用于科研、教學機(ji)構,檢(jian)驗、檢(jian)疫(yi)等(deng)。

如(ru):啟步BSW-2T,BSW-3T,BSW-6T-I/II ,ABI 9700,ABI Veriti, Bio-Rad T100 PCR儀

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原位PCR儀(yi)：

PCR是提(ti)取(qu)細胞(bao)或組織(zhi)中(zhong)的(de)DNA進(jin)行(xing)基(ji)因擴增反(fan)應，而原位PCR是保持細胞或組(zu)織的完整性，使PCR反應體(ti)系滲透(tou)到組織和(he)細(xi)胞(bao)(bao)中，在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)靶DNA所在的位置上進行基(ji)因擴增。不但可以(yi)檢測到靶DNA，而且還可以了解靶DNA存在于(yu)(yu)何種(zhong)細胞中，更(geng)有(you)利于(yu)(yu)探討靶DNA與細胞之(zhi)間的(de)關系。

    原位PCR儀(yi),主要應用于(yu)：（1）檢(jian)測(ce)外源性基因片段，提高檢(jian)出率，集中在病(bing)毒感染的檢(jian)查上，如HIV、HPV、HBV、CMV等；（2）觀察病(bing)原體在體內分布規(gui)律(lv)（3）內源性(xing)基因(yin)片(pian)段，如(ru)人體的單基因(yin)病、重組基因(yin)、易位的染色體、Ig的mRNA片(pian)段、癌基因片(pian)段等。（4）檢測導(dao)入基因；（5） 遺(yi)傳病(bing)基因檢(jian)測(ce)如β－地中海貧血。 

實時熒光定量PCR儀：

在普通PCR儀設計基礎上增(zeng)加熒(ying)光信號(hao)采集(ji)系統和(he)計算機分析處(chu)理系統，形成了具有熒(ying)光定量功能(neng)的PCR儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴(kuo)增(zeng)原理相同(tong)，在(zai)PCR擴增(zeng)(zeng)時(shi)加入的引物(wu)是(shi)利用(yong)同位素(su)、熒(ying)光素(su)等進行標記，使用(yong)引物(wu)和熒(ying)光探(tan)針(zhen)同時(shi)與模板(ban)特異性結(jie)合擴增(zeng)(zeng)。擴增(zeng)(zeng)的結(jie)果通過熒(ying)光信(xin)號(hao)(hao)采集系統(tong)實(shi)時(shi)采集信(xin)號(hao)(hao)連接輸(shu)送到計算機分析(xi)處理系統(tong)，得出量化的實(shi)時(shi)結(jie)果輸(shu)出。

   熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀有單(dan)通道(dao)，雙通道(dao)和(he)多(duo)(duo)通道(dao)之分(fen)。當只用(yong)一種熒光探針標(biao)(biao)記的(de)(de)時候，選用(yong)單(dan)通道(dao)；有多(duo)(duo)種熒光標(biao)(biao)記的(de)(de)時候使用(yong)多(duo)(duo)通道(dao)。單(dan)通道(dao)也(ye)可以檢(jian)測多(duo)(duo)熒光的(de)(de)標(biao)(biao)記和(he)目(mu)的(de)(de)基(ji)(ji)因(yin)表達產物(wu)，因(yin)為一次只能(neng)檢(jian)測一種目(mu)的(de)(de)基(ji)(ji)因(yin)的(de)(de)擴增(zeng)量，需多(duo)(duo)次擴增(zeng)才能(neng)檢(jian)測完不同的(de)(de)目(mu)的(de)(de)基(ji)(ji)因(yin)片段的(de)(de)量。多(duo)(duo)通道(dao)利于(yu)做多(duo)(duo)重PCR，實現一次檢測多種(zhong)目的基因的功能。

   熒光定(ding)量(liang)PCR儀主要應用于臨床醫學檢測(ce)、生(sheng)物醫藥研(yan)發、食品行(xing)業、科研(yan)院校等。熒(ying)光定量檢測(ce)技術(shu)在(zai)臨床診(zhen)斷(duan)方面很多，主要集中在(zai)各(ge)種病原體引起疾病的(de)臨床診(zhen)斷(duan)，如(ru)肝炎類疾病、性病、與優生(sheng)優育(yu)相關(guan)的(de)疾病以及肺結核等等。

文(wen)章來源(yuan)來：啟步生物